Antikörper Protokolle und Informationen

Profitieren Sie von unserer langjährigen Erfahrung in der Antikörperentwicklung, der Produktion und dem Handling mit unseren Protokollen und Methoden zum Umgang mit Antikörpern. Die ausgewählten Protokolle und Informationen rund um Antikörper wurden von unseren Wissenschaftlern erstellt. Gerne können Sie die Protokolle mit Ihren Kollegen teilen und sammeln.

Allgemeine Informationen

	Beschreibung	Download [pdf]
	Antikörper Lagerung	Lagerungs Protokoll
	Commercial Invoice Beispiel für den Versand von Antigenen aus Nicht-EU Ländern nach Deutschland	Beispiel einer Commercial Invoice

Anwendungen und Protokolle für Antikörpern

	Beschreibung	Download [pdf]
	ELISA Titer Bestimmung	ELISA Protokoll
	ELISA mit HRP	HRP ELISA Protokoll
	WesternBlot	WesternBlot Protokoll
	IHC mit gefrorenem Gewebe	IHC Protokoll
	IHC mit paraffin eingebettetem Gewebe	IHC Paraffin Protokoll
	Immunopräzipitation mit IgY Antikörpern	IP Protokoll für IgY
	Herstellung von Zellsuspensionen aus Milz und Lymphknoten	Zellsuspension Protokoll
	Proteinbestimmung mittels Bradford	Bradford Protokoll
	Durchflusszytometrie	FACS Protocol

Protokolle für die Molekularbiologie

	Beschreibung	Download [pdf]
	Produktion von chemisch kompetenten E. coli und deren Transformation	Kompetente Zellen Protokoll
	Protein Expression in E. coli	Protein Expressions Protokoll
	SDS-PAGE Gelpräparation	SDS-PAGE Protokoll
	Polymerase Kettenreaktion	PCR Protokoll
	DNA/RNA Gelelektrophorese	DNA Gelelektrophorese Protokoll
	Davids Cell Membrane Conservation KIT für die Immunisierung	K105 Anleitung

Antikörper Informationen

	Beschreibung	Download [pdf]
	Monoklonale Antikörperentwicklung	Monoklonale Antikörper Informationen
	Antigene mit tag	Information über Antigene mit Tag

Lustige Experimente

Die folgenden Experimente könnten sich beispielsweise dazu eignen Auszubildenden, Schülern oder einfach naturwissenschaftlich Interessierten die Chemie und Biologie spielerisch näherzubringen. Bitte beachten Sie aber, dass für einige der Experimente gefährliche oder giftige Substanzen benötigt werden. Aus diesem Grund müssen die Sicherheitsanweisungen der Chemikalien und Geräte unbedingt beachtet werden. Hierzu sollten die MSDS und Betriebsanweisungen in dem durchführenden Labor gelesen und beachtet werden.

	Beschreibung	Download [pdf]
	Elephantenzahnpasta: Katalytische Reaktion des Wasserstoffperoxids zu Sauerstoff. Führt zu einer großen Schaumbildung in Kombination mit Spülmittel.	Elephantenzahnpasta Protokoll
	Chromatographie mit Süßigkeiten.	Chromatographie Protokoll
	Redox-Reaktion mit Methylenblau	Magische Flasche Protokoll
	Säure Basen Reaktion mit Gasentwicklung	Lava Lampe Protokoll

Antikörper von Davids: Puffer

Wir versenden die Antikörperfraktionen in unterschiedlichen Puffern. Je nach Ihrem Anwendungsgebiet benötigen Sie unterschiedliche Bedingungen. Geben Sie uns vor dem Start der Antikörperproduktion an, wenn Sie die Antikörper in einem anderen Puffer oder ohne Konservierungsmittel benötigen.

Fraktion	Puffer	Zusätze
Antisera	NA	0,02% Na-Azide
Antigenspezifische affinitätsgereinigte Seren	0,1 M Phosphat Puffer 10 mM Na-Acetat	0,02% Na-Azide Enthält Zucker
ProteinA gereinigte Antikörper	0,1 M Na-Acetat	0,02% Na-Azid Enthält Zucker
PrepI Hühnerantikörper	1 x PBS	0,02% Na-Azide
PrepII Hühnerantikörper	1 x PBS	0,02% Na-Azide
PrepIII Hühnerantikörper	1 x PBS	Sterilfiltriert

Antikörper von Davids

Affinitätsreinigung

Die Menge der Antikörper, die mit der antigenspezifischen Affinitätsreinigung gereinigt werden, variiert. Je nach Antigen, Titer und Serummenge erhalten wir von einem Kaninchen oder 10 Eiern 0.5 - 10 mg Antikörper. Zusätzlich erhalten Sie ein Aliquot des Rohserums als Backup. Wenn Sie kein BackUp Serum benötigen geben Sie dies bitte bei der Bestellung an. In diesem Fall reinigen wir das gesamte Serum.

Antikörpermenge

Sie erhalten ein Preimmunserum mit den finalen Antikörpern. Bei vielen Immunisierungsprotokollen ist die Entnahme eines sogenannten Testserums (in der Regel am Tag 35) enthalten. Mit diesem Testserum überprüfen wir die Antikörperentwicklung und passen das Immunisierungsprotokoll gegebenenfalls an. Sie können ein Aliquot des Testserums (0,5 - 1 ml) erhalten. Sie zahlen nur die Versandkosten.
Die finale Antiserummenge beträgt bei Kaninchen zwischen 40 und 90 ml. Nach der finalen Blutung können keine weiteren Antikörper gewonnen werden. Wenn Sie mehr Antikörper benötigen können Sie große Testseren erhalten. Der Vorteil von Antikörpern aus Hühnereigelb besteht darin, dass Sie auch nach der ersten Lieferung weitere Antikörper erhalten können. Hühner produzieren dann ca. alle 14 Tage die Antikörpermenge, die Sie von einem Kaninchen erhalten. Über mehrere Wochen oder Monate erhalten Sie so eine große Anzahl an Antikörpern.

Antikörper Informationen

B-Zellen und Antikörperproduktion im Körper

B-Lymphozyten sind in der Lage Antikörper zu produzieren. Der Name der B-Lymphozyten leitet sich von Ihrer Herkunft ab: Bursa fabricii in Vögeln, bzw. Knochenmark (Bone Marrow) in Säugetieren.
Um die Immunantwort auszulösen wird ein Antigen benötigt. Das Antigen (z.B. Bakterien oder Viruspartikel) wird als Fremdkörper von den Makrophagen erkannt. Diese verdauen die Fremdkörper und lösen sie auf. Stücke des aufgelösten Antigens (Epitope) werden von ihnen auf der Oberfläche präsentiert. T-Helfer Zellen erkennen diese Epitope und werden aktiviert. Simultan kommen die B-Zellen in Kontakt mit dem Antigen und präsentieren es auf ihrer Oberfläche. Die aktivierten T-Helferzellen produzieren Interleukine, wenn sie das Antigen, welches von der B-Zelle repräsentiert wird ,erkennen. Das führt zur "Klonalen Expansion" der B-Zellen (Reproduktion) und zur Spezialisierung der B-Zelle: Einer Antikörperproduzierenden Plasma-Zelle.

Antigen

Antigene (Antikörper Generierend) sind Moleküle, an die Lymphozyten und Antikörper binden können. Es ist das Molekül, gegen das Sie die Antikörper produzieren möchten. Das Stück des Antigens, an dem der Antikörper bindet nennt man Epitop. Lymphozyten können nahezu jede Art von Antigen erkennen. Das sichert die somatische Rekombination der Lymphozyten. Die Antikörper-kodierenden Gene werden rekombiniert, um eine riesige Menge an unterschiedlichen Antikörpern zu generieren, die jedes mögliche Antigen erkennen.
Antigene können zum Beispiel Peptide, Proteine, Viruspartikel, Zellen, Bakterien, DNA oder kleine Moleküle sein.

Titer

Die Titerbestimmung ist eine indirekte Methode zur Bestimmung der Konzentration der antigen-spezifischen Antikörpern im Blut. Das Antigen wird in die Wells einer Mikrotiterplatte gebunden. Das Serum wird in mehreren Verdünnungen aufgetragen (z.B. 1:5, 1:25, 1:125, ..., 1:325000). Die höchste Verdünnung, bei der die spezifischen Antikörper detektierbar sind ist der Titer. Ein guter Titer beginnt bei 1:16000.
Wie bei einer Impfung entwickelt sich ein Titer gegen ein Antigen, wenn die Tiere mehrfach mit dem Antigen immunisiert werden. Antikörper gegen dieses Fremdmolekül werden gebildet.

Polyklonal und Monoklonal

Da in jedem gesunden Tier Antikörper gegen sämtliche Antigene vorhanden sind, mit dem das Tier bereits in Kontakt gekommen ist, enthält das Serum neben den Antigenspezifischen Antikörpern auch unspezifische Antikörper. Das Serum kann durch eine Affinitätsreinigung gereinigt werden. Dadurch erhält man die spezifischen Antikörper. Es gibt viele verschiedene Antikörper, die das Antigen erkennen. Zum Beispiel mehrere Epitope des gleichen Antigens. Aus diesem Grund spricht man von polyklonalen Antikörpern (erkennen verschiedene Epitope des gleichen Antigens).
Im Gegensatz dazu stammen monoklonale Antikörper von einer B-Zelle. Eine Fraktion von monoklonale Antikörpern enthält aus diesem Grund nur einen Antikörper, der ein Epitop erkennt.

Anwendungen von Antikörpern

Antikörper werden zum Beispiel in der Wissenschaft zur Detektion von Molekülen oder Proteinen verwendet. So sind Anwendungen, wie WesternBlots, Fluorescent Activated Cell Sorting, ELISA (enzyme-linked immunoabsorbent assay), ChIP oder andere Assays durchführbar. Mittels Immunohistochemie (IHC) ist es möglich Proteine in Zellen oder Gewebe zu lokalisieren. So können auch Krebszellen identifiziert und lokalisiert werden, die besondere Antigene exprimieren.
In der Diagnostik können Antikörper eingesetzt werden, um Substanzen und Zellen im Blut oder Nahrung zu detektieren. So können Lipide, Medikamente, Viruspartikel, Hormone oder andere Antikörper detektiert werden. Dies wird in der Regel mittels ELISA, Agglutination oder Immunopräzipitation durchgeführt.
Antikörper können darüber hinaus auch zur Therapie von Krebs und Krankheiten oder zur Impfung verwendet werden. Es gibt beispielsweise Antikörper gegen verschiedene Krebsarten, Auto-Immunkrankheiten, Corona oder AIDS.

Peptid Antikörper

Wenn Sie Antikörper gegen ein Protein entwickeln möchten, aber nur die Sequenz kennen, können wir Peptide für Sie synthetisieren, die Ihr Protein repräsentieren. Bei der Auswahl geeigneter Peptide helfen Ihnen unsere Wissenschaftler mit unserem Vorhersagealgorithmus. Dieser berechnet die Antigenizität, die Löslichkeit und die Epitopwahrscheinlichkeit der einzelnen Peptide. Da auch die 3D-Struktur und Proteinmodifikationen, wie Glykosylierung oder Oberflächenlipide, eine Rolle in der Antikörperbindung und -entwicklung spielen, empfehlen wir 2 oder sogar 3 Peptide in einem Gemisch zu immunisieren. So steigt die Wahrscheinlichkeit, dass Sie für Ihre Anwendungen die besten Antikörper erhalten. Besuchen Sie unsere Peptidantikörper Seite für weitere Informationen.